在免疫組化反應中最重要，包括孵育時間和抗體濃度。一抗孵育溫度有幾種：4℃、室溫、37℃，其中4℃效果最佳；孵育時間：這與溫度、抗體濃度有關，一般37℃1-2h，而4℃過夜和從冰箱拿出后37℃復溫45min。具體條件還要摸索。
判斷感受態(tài)細胞制備的優(yōu)劣主要是通過轉化效率來檢測。經轉化外源質粒DNA的大腸桿菌在含抗性的LB平板過夜培養(yǎng)后，平板上長滿克隆且陰性對照（未轉入外源DNA的感受態(tài)）沒有克隆，證明感受態(tài)細胞制備良好。
對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進行監(jiān)控，因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。常規(guī)熒光定量PCR的流程是：樣品采集-運輸-樣品處理-核酸提取-反轉錄（RNA病毒）-擴增-結果讀取。
支原體（Mycoplasma）是一種大小介于細菌和病毒之間（0.1 - 0.6μm），沒有細胞壁、并獨立生活原核生物，形態(tài)呈高度多形性，呈圓形、絲狀或梨形。由于支原體直徑較小，進行除菌過濾是，約1%的支原體可以直接穿過常規(guī)的0.22μm的微孔除菌濾膜，造成細胞的支原體污染。
常見的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根據耐熱性來分可分為耐熱酶和常溫酶。耐熱聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等，常溫聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根據保真度來分，高保真聚合酶 Pfu、KOD、Phanta 等，普通聚合酶 Taq 等。
細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養(yǎng)技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現(xiàn)在可以大規(guī)模生產。
質粒提取的得率和質量與很多因素有關，如宿主菌的種類和培養(yǎng)條件、細菌細胞的裂解、質粒拷貝數(shù)、質粒的穩(wěn)定性、抗生素、吸附膜的吸附能力、提取操作的熟練程度等等。
