我們進入實驗室要穿好工作服,不要存僥幸心里,如果一不小心碰到酸,心愛的衣服燒個洞是小事,燒傷皮膚就麻煩了。不要嫌麻煩,一定要戴手套才做對身體有危害的實驗,要對自己的身體負責。
紫外線消毒:在室溫20℃~25℃時,220V 30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7mm紫外線輻射強度應≥70uW/cm2,低于此值時應更換。適當數量的紫外燈,確保平均每立方米應不少于1.5W。
質粒具有穩(wěn)定可靠和操作簡便的優(yōu)點。如果要克隆較小的DNA 片段( <10kb) 且結構簡單,質粒要比其它任何載體都要好。在質粒載體上進行克隆,從原理上說是很簡單的,先用限制性內切酶切割質粒DNA 和目的DNA 片段,然后體外使兩者相連接,再用所得到重組質粒轉化細菌,即可完成。但在實際工作中,如何區(qū)分插入有外源DNA 的重組質粒和無插入而自身環(huán)化的載體分子是較為困難的。
輔酶盡管不同于酶的底物,但在作用方式上和底物類似,在酶反應過程中與酶結合、分離及反復循環(huán)。輔酶用量的確定可將它們按底物處理。例如乳酸脫氫酶中輔酶按雙底物動力學方程計算。
血清并不是生來就為養(yǎng)細胞而來的。血清是全血的一部分,組分很復雜,有 150 多種已知組分組分,多種未知組分。這些組分中,有些對細胞生長是有利的,有些對細胞生長是無作用的,有些對細胞生長反而是有害的。
微生物的培養(yǎng)基通常指人工配制的適合微生物生長繁殖,或積累代謝產物的營養(yǎng)基質。廣義上說,凡是支持微生物生長繁殖的介質或材料,均可作為微生物的培養(yǎng)基。一個適當的培養(yǎng)基配方,對發(fā)酵產品的產量和質量有著極大的影響。
瞬時轉染:外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低,所以以染色體外(episomal)形式存在,不能隨細胞分裂而一同復制導致最后拷貝數被稀釋導致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質粒的量,所以起初轉染的質粒拷貝數極高。這就導致瞬時轉染呈現(xiàn)一個高拷貝到低拷貝迅速降低的過程,且無法在這個系統(tǒng)上實現(xiàn)可誘導表達。
在western blot 過程中,分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節(jié),然而就是這樣一個小細節(jié)對實驗結果有著不可忽視的作用。這個 Western Blot參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小,只有標準量精確無誤了,實驗結果才有說服力,除此之外,蛋白標準還有表示轉移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用,所以選擇正確的蛋白Marker也是western blot實驗成功的必要條件之一。
標準物質:具有一種或多種足夠均勻和很好地確定了的特性值,用以校準設備,評價 測量方法或給材料賦值的材料或物質。標準物質是一種計量標準, 都具有標準物質證書, 對每個標準值都具有給定置信水平的不確定度。